原料分析方法开发思路及案例分享来源：姚博/辣椒

原料药的质量是药品质量控制的关键和源头，其中杂质研究是重点和难点之一。根据ICH Q3A(R2)指南，药物杂质可分为无机杂质、有机杂质和残留溶剂。无机杂质主要指催化剂、无机盐、配体、试剂等。在原料药制备过程中添加；有机杂质主要是指原料药、中间体、副产物等工艺杂质，以及药物在储存过程中降解产生的挥发性或非挥发性杂质；残留溶剂主要是在API合成过程中用作载体制备溶液或悬浮液的液体。杂质控制水平在一定程度上反映了药品质量，所以压力给了原料药企业。如何在保证原料药质量的同时有效控制杂质含量？而且随着新药的开发，杂质研究的深度和广度都在增加。我们做什么呢5月26日，磨憨小分子事业部分析总监、R&D蒋慧娟做客《原料药分析方法开发思路与案例分享》现场讲座，从中或许可以找到答案。

新药开发不同阶段对分析方法的要求。分析方法是为完成各种检测项目而设定和建立的，是了解杂质信息的重要手段。根据ICH Q14草案，分析方法开发的目的是确定分析物的一个或多个属性，在可报告的范围内具有特定的特异性/选择性、准确度和/或精密度。《化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则》 (2005)指出，分析方法通常包括：分析方法原理、仪器仪表参数、试剂、系统适用性实验、试液的制备、参考液的制备、检测结果的测定、计算和报告等。随着新药的发展，原料药的生产工艺和参数在不断变化，相应的分析方法也要不断改进。因此，需要不断发展和优化分析方法，以获得适合预期目的的分析方法，从而开启分析方法的生命周期闭环。

下图概述了药物开发不同阶段对分析方法的要求。

新药研发不同阶段对分析方法的要求图片来源USP由于此前一直没有权威的官方分析方法开发指南，CDE发布了药物研发不同阶段分析方法的区域性指导原则。如《化学药品创新药 I期临床试验申请药学共性问题相关技术要求》中，关于质量标准和分析方法存在一些共性问题：申请人简单提供质量标准，部分重点项目缺乏分析方法，未能提供重点项目分析方法必要的验证资料。CDE提出的总体要求是：按照《新药 I 期临床试验申请技术指南》的相关要求，研究制定临床试验样品的质量标准，并以表格形式提供相关的检验项目和可接受限度。注意关键项目的具体分析方法(如有关物质、残留溶剂、金属催化剂和金属试剂残留、遗传毒性杂质、溶出/释放速率、含量等。)和必要的方法学确认信息(如至少包括特异性、敏感性等。).055-79000原料药有关物质的研究和控制也存在一些问题：原料药杂质质谱分析不够；有关物质分析方法的检测能力不足；杂质控制和限量制定的依据不足。CDE提出的总体要求是：参照ICH Q3A等相关指导原则开展杂质研究，全面分析杂质来源，开展去除和转化研究，合理制定控制策略，提供完整的杂质谱研究信息和数据。要研究加速试验和长期试验中超过鉴别限的降解杂质的归属，重视影响因素试验条件下降解杂质的研究，增强对降解途径的理解。如果生产工艺发生变化，应对可能出现的新杂质进行分析研究，并考察相关物质方法的适用性。应充分验证相关物质分析方法，合理选择杂质定量方法。如外标法、带校正因子的自身对照法等定量方法要进行评价，要考虑杂质对照品的难易度和连续供应，以及主成分作为对照的合理性。根据ICH Q3A等相关指导原则，合理设定杂质限量，限量的建立应以动物安全性试验为基础。必要时，应再次进行动物安全性试验。此外，值得补充的是，ICH Q14填补了分析方法开发工具的空白。详细分析直接看《化学药品创新上市申请前会议药学共性问题及相关技术要求》。

根据ICH Q14对产品和过程的理解(ICH Q8和ICH Q11“原料药的开发和生产”)，可以识别出需要分析和检验以进行控制的质量属性。这些属性的描述可以在目标产品的质量概况(QTPP)中找到，测试要求可以记录在ATP(分析目标概况)中，ATP构成了分析方法开发的基础。ATP包括预期目的的描述、待测产品属性的详细信息、相关性能特性和相关性能标准。有助于技术选择、方法设计和开发，以及后续性能监测和分析方法的持续改进。ATP在整个生命周期内得到维护，也可以作为生命周期管理的基础，以确保分析方法始终适用于预期用途。

方法筛选和方法选择图片来源：参考文献1具体分析方法的开发过程需要关键步骤。首先，需要确定正在开发的方法的类型，所开发的方法是否用于检测或纯度、残留溶剂或粒度测定。还需要确定化合物的性质(活性药物成分、赋形剂等。)和选择技巧。对此，江宗特就原料药分析开发中检测项目和分析方法的实践做了如下总结。

API分析方法发展概述

来源：直播讲座的PPT分析方法开发出来后，还需要优化，因为每种分析方法都必须适合其预定用途和阶段。优化之后，验证分析方法成为下一个重点，这一步也是API成功的关键。本文重点分享博滕药业开发有关物质通用分析方法的过程。该过程分为四个步骤，包括样品制备和技术选择、方法筛选、方法优化和方法确认或预验证。1.样品制备和技术选择。boten引入ACD/Labs预测杂质，开发了pKa、LogD等API辅助方法。同时根据杂质谱，含有起始原料、中间体、反应副产物、降解杂质等的样品。用于方法开发。此外，还将考虑粗制产品和强制降解样品。

图片来源：现场讲座PPT截图2。方法筛选该步骤的主要目的是对不同的色谱柱、不同pH值的流动相和不同的有机溶剂进行筛选，根据检测能力和ACD/Labs辅助判断筛选结果。

图片：现场讲座3的PPT截图。方法优化初步筛选后，将进行进一步的方法优化，如梯度、检测波长、流速、柱温、样品浓度、进样量等。同时，ACD/Labs辅助单因素或多因素优化，初步确定了最佳色谱条件，大大提高了提高方法的效率。

图片：现场讲座4的PPT截图。方法确认/预验证。方法初步确定后，需要对方法进行确认或预验证。具体项目包括专属性(包括强制降解实验)、LODLOQ、方法持久性等。如有必要，优化方法以确定最终的色谱条件。

图片：现场讲座PPT截图以上流程完成后，会生成一份原料药的物质开发报告。

小原料药的分析方法开发是质量研究的重点和难点，需要大量的专业知识，国家药品监督管理局一直遵循提高的监管要求。一般来说，分析方法的开发是一项由多年经验、经验教训和战略思维磨练而成的技能，并以完善的科学流程为后盾。因此，一个合适的、有经验的CDMO可以帮助企业大大缩短从临床前到商业化的生命周期，为新药研发保驾护航。

参考文献：[1]使用分析目标图谱选择分析技术和开发分析程序。分析化学2022 94 (2)，559-570 doi:10.1021/ACS . analchem . 1c 03854